可使用分子生物技术对禽H7N9的检测

　　

　　科普：H7N9是禽流感的一种亚型。流感病毒颗粒外膜由两型表面糖蛋白覆盖，一型为血细胞凝集素（即H），一型为神经氨酸酶（即N），H又分15个亚型，N分9个亚型。所有人类的流感病毒都可以引起禽类流感，但不是所有的禽流感病毒都可以引起人类流感，禽流感病毒中，H3、H5、H7、H9可以传染给人，其中H5为高致病性。H3为人犬共患，依据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型，H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种。这个病毒的生物学特点、致病力、传播力，还没有依据进行分析判断。

　　

　　现在实验室的检测大多是用的RT-PCR（反转录-聚合酶链式反应)，先说PCR（聚合酶链式反应），大家都知道DNA是由ATCG四种碱基配对形成的双链，PCR方法就是找到这个病毒所特有的DNA片段后加入酶（就是高效催化剂）和碱基（相当于原料）生产DNA片段到能进行检测的程度。至于RT（反转录）就是把RNA转化成DNA。

现在来看一下亿森宝实验室的检测流程：
1生物安全柜（或超净工作台），提取RNA全程都在这里面操作

      
2.口罩，防止操作人呼出的气体对提取的RNA造成污染

3.冷冻高速离心机，使用时能保证高速离心的RNA溶液不会过热

4.YS-RNA提取试剂盒（离心柱法），提取H7N9禽流感病毒RNA

5.把送检的样品加有机溶剂使细胞破裂释放出RNA，在经过这个离心柱过滤，RNA就留在提取柱的膜上了

6.提取完成，管子底部那一点点的溶液就是

 

7. 使用禽流感H7N9 RT-PCR凝胶检测试剂盒检测取H7N9禽流感病毒，试剂盒平时用专门的超低温冰箱在-20℃以下保存

8.PCR扩增仪，这台仪器能把刚才提取到的RNA扩大几百万倍

9. 染色液和电泳仪。PCR扩增产物是有极性的，加到电泳仪里面通电后会在琼脂凝胶中移动。有的染色液有致癌性，建议做实验时做好防护工作

10.凝胶成像系统，由于琼脂凝胶中加了染色液能让RNA染色然后被这机子的紫外灯检测出来，然后输入到电脑中就得到结果

 

11.结果图从左到右分别是Maker、阳性对照、未知样品、阴性对照。在500bp处有条带为H7阳性样品，在300bp处有条带为N9阳性样品，否则为阴性样品